熒光相機附在熒光顯微鏡上實驗裝置用安裝有Lambert HiCAM高速攝像系統的熒光顯微鏡對斑馬魚進行研究(圖2)。將魚固定在凝膠中,從下方照射。DsRed蛋白的熒光從紅細胞中發出。這種光向各個方向發射,其中一些光以相反的方向穿過激光的光路。但是,熒光通過二色鏡被定向到相機上,而不是被反射回光源。任何散射的激發光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光,只透射紅細胞熒光發出波長的光。圖像傳感器將捕捉進來的熒光。捕捉將以每秒數百或數千幀的幀率下進行,每幀的曝光時間數量級在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子倍增CCD (EMCCD)傳感器的光靈敏度足以捕捉到微弱的熒光。但它們在全分辨率下只能實現大約10 ...
間的串擾,在熒光顯微鏡中使用四個以上探針標記樣品具有挑戰性,而在共振增強SRS成像中,多探針標記可以擴展到數十個不同的探針。就多重成像而言,這種能力是一個巨大的勝利,因為許多細胞生物學研究需要多個分子參與者的可視化來揭示細胞內的過程和途徑。通過共振增強SRS提供的多路復用能力可以進一步推動到更低的探針濃度。通過讓探針選擇性僅由SRS激發過程決定,原則上可以放寬檢測端的帶寬。這意味著在拉曼躍遷之后,分子可以在第②步中被激發到發射電子狀態,允許通過熒光發射有效地檢測發色團。如果電子躍遷以成功的拉曼躍遷為條件,則可以根據其狹窄的拉曼帶選擇發色團,同時通過熒光檢測策略提高探測靈敏度。這一過程被稱為受激 ...
105。然而熒光顯微鏡技術可以捕捉到來自單個分子的信號,即使是敏感的CRS方法也需要成千上萬個目標分子來產生可檢測的信號。因此,關注提高靈敏度是擴大CRS技術使用的重要策略。CRS成像的對比度來源于分子化合物的振動特征。對于內源性分子,這種標記的數量是有限的。大量的物種和有限數量的振動特征的結合導致了重疊帶結構的密集光譜。在這種背景下識別單個物種構成了振動光譜學的基本挑戰。因此,提高CRS分子特異性的方法有機會使該技術得到更廣泛的應用。上述這三個性能目標,高光譜成像速度,靈敏度和分子特異性,在過去十年中,已成為CRS顯微鏡領域發展的重要動力。更多詳情請聯系昊量光電/歡迎直接聯系昊量光電關于昊量 ...
于廣泛應用于熒光顯微鏡的STORM或PALM方法。超分辨率拉曼成像一直是人們追求的目標,盡管目前取得了一些有趣的突破,但新的超分辨率方法的開發仍然是該領域的熱點。與腈相比,炔標記提供了兩倍以上的信號強度,并且根據炔在生物分子中的定位,其拉曼信號漂移——末端炔出現在約2100 cm?1處,內部炔出現在約2200 cm?1處——如果選擇適當的標記定位組合,就可以對不同的炔標記分子進行多路成像。由于這些原因,炔標記是目前應用廣泛的拉曼標記策略,并已被用于研究脂類、蛋白質、糖和核苷酸。如果您對拉曼光譜成像有興趣,請訪問上海昊量光電的官方網頁:http://www.champaign.com.cn/thr ...
Bleedthrough還是Crosstalk,這是一個問題以下三張放大40倍圖片是FITC標記的肌動蛋白和Cy3標記線粒體,并使用Lumencor SPECTRA X八通道LED顯微鏡光源對兩種熒光染料進行激發,用于顯示Bleedthrough和crosstalk的不同表現以及不同的解決方案。圖1.SPECTRA X 光引擎青色光通道激發,485/25濾光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四帶通多邊分束器和發射濾光片在這幅圖像中同時存在bleedthrough和crosstalk現象。Bleedthrough表現為圖像中細胞外灰度相對較高(對比圖2,已消除bleed ...
A光引擎通過熒光顯微鏡觀察水質中藍藻和綠藻的快速方法。當我們分析水華的成分時,熒光顯微鏡比DIC相位顯微鏡更加合適。熒光顯微鏡可以利用水華細胞中的色素或熒光染料來區分不同的藻類種類,而DIC相位顯微鏡可以顯示細胞樣品的細微結構和凹凸變化,不太方便區分不同的藻類,當然如果需要分辨的藻類有明顯的形態以及結構方面的差異同樣也可以使用。而熒光顯微鏡可以利用特定的熒光探針來檢測水華細胞中的毒素或營養物質,從而評估水華的危害性和生理狀態。DIC相位顯微鏡雖然可以顯示細胞的三維立體影像,但對于透明或折射率差異小的樣品,其對比度和分辨率較低。對藍藻和綠藻而言,綠藻主要含有葉綠素,可以用藍光有效地激發。藍藻含有 ...
然后通過延時熒光顯微鏡監測20小時(圖1B)。為了使GFP熒光真實地展現蛋白質表達水平,穩定且可重復的激發光源至關重要,這使得SOLA光引擎成為該應用的理想高性能照明光源,并且低熱量與低噪聲也便于獲得更加優質的圖像信息。除了表征起效時間和蛋白表達速率的顯著細胞間變異性(圖1)外,LISCA還用于確定血清蛋白對不同mRNA-脂質復合物制劑的細胞攝取的影響。圖1:(A)單個GFP表達的HuH7細胞排列在微圖纖連蛋白上。(B)代表GFP表達的單細胞熒光軌跡。灰色陰影區域表示mRNA -脂質復合物培養的zui初1小時。(C) 是(B)的放大區域,顯示細胞間蛋白表達起效的變異。根據知識共享署名許可條款, ...
低分辨率。在熒光顯微鏡中,視野中的任何染料分子都會受到刺激,包括離焦平面中的染料分子。共聚焦顯微技術利用共聚焦系統有效地排除了焦面以外光信號的干擾,提高了分表率,實現了光學切片。目前,共聚焦顯微成像技術是生物醫學領域非常重要的分析工具,借助該技術,研究人員能夠對細胞中的特定成分進行光學切片和三維(3D)重建。自20世紀60年代引入柔性胃腸(GI)內窺鏡檢查以來,內窺鏡成像技術不斷取得進步。在過去的幾十年中,內窺鏡已被用于以微創或無創的方式觀察空腔內部或人體內部器官的表面,以進行診斷或手術。目前臨床上常用的白光和窄帶光內窺鏡無法達到細胞水平的分辨率,因此無法實現光學活檢,嚴重降低了診斷的準確性。 ...
的商用寬視場熒光顯微鏡和一個鉆石成像芯片組成,磁性樣品安裝在該芯片上。磁性對比是由在金剛石表面下設計的NV缺陷中心發出的熒光信號獲得的,系統提供三種不同的成像方式,可以單獨使用或組合使用。首先,在沒有外加磁場的情況下,可以使用NV自旋的光學檢測磁共振(ODMR)來解析磁位的等磁場線。第二以定量地繪制整個視場中每個單獨位的雜散磁場,并將結果與記錄介質的理論模擬進行比較。zui后,可以利用基于NV自旋弛豫對比的全光成像方式,特別適用于強離軸磁場成像。圖1所有三種成像方式均在同一寬視場磁成像顯微鏡上進行,見圖1a。圖1所示為金剛石基寬場磁成像的實驗布置。(a)為儀器原理圖,說明了綠色激光激發的倒置顯 ...
光引擎一直是熒光顯微鏡領域的第1選擇,以其多功能性和卓越性能而著稱。它為研究人員提供了激發光譜的精確控制,在z小化串擾(crosstalk)、光譜滲漏(bleed-through)、自發熒光(autofluorescence)以及其他有害背景來源的同時也優化了激發的效率【1】。SPECTRA X光引擎(2023)在其新版本中保留了用戶可更換的帶通濾光片,同時引入幾項重大改進:擴展光譜內容:新型號采用固態LED光源,增大了光譜范圍,同時增強了與帶通濾光片和熒光基團的兼容性,其中包括 365 nm 和 660 nm 處的新激發窗口(圖 1)。更大的輸出功率:六個固態光源中的每一個的濾波可輸出功率為 ...
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