天我們要說的熒光觀察(Fluorescence Microscope)要介紹熒光顯微鏡,我們需要先簡單介紹一下熒光原理:在光的照射下,具有熒光特性的物質的電子在吸收能量后,可由低能級電子層躍遷到高能級電子層。高能態的電子是不穩定的,它會在極短的時間內(10-8s),以輻射光的形式釋放能量后,回到原來的能態。這時發出的光即為熒光(fluorescence),其波長比激發光的波長要長,原理如圖2-6所示。利用物質對光吸收的高度選擇性,可制成各種濾片,吸收一定波長范圍的光或允許特定波長的光通過,用來激發不同的熒光素,產生不同顏色的熒光。對于熒光的激發波長一般都在紫外和可見波段,而對于熒光的發射波段一 ...
熒光成像內窺鏡—激光技術在醫療成像與治療中的創新應用內窺鏡檢查是腫瘤學中檢測和切除并且已經逐漸成為腫瘤的腫瘤或癌前病變的特別重要的工具。內窺鏡成像通常使用正常白光進行。然而某些腫瘤在白光下可能難以檢測到,因為所有結構都被照亮,對惡性病變沒有特異性。因此,通過對患者使用特殊的熒光染料,使熒光染料優先積聚到惡性病變中,這樣在特定波長的光被激發時,惡性組織和健康組織之間的對比度就會增加,此為熒光成像內窺鏡。熒光成像內窺鏡在醫學中的應用背景涉診斷與評估治療效果。在腫瘤檢測方面,研究顯示熒光定量內窺鏡(QFE)可以用于術前新輔助治療效果的評估。例如在直腸癌患者中,QFE識別活性腫瘤組織的準確率達到92% ...
革新生物多重熒光檢測應用光譜鑒別的局限性大多數多路復用檢測方案都基于光譜鑒別,因為與基于時間或空間鑒別方法相比,它的技術復雜性較低,成本也較低。然而由于光譜串擾,光譜的鑒別方法范圍僅限于大約5個目標(圖1和圖2)。這種局限性主要是由于用于雙分子標記的熒光染料和熒光蛋白(FP)的光譜特性,如圖1 所示。在此示例中,雖然只有兩個熒光標記,但它們的激發和發射波長跨越了整個可見光波長范圍(400-700nm),并且具有明顯的光譜重疊,會導致光譜分離不完全。如果以485nm左右的光進行激發(灰色部分),兩種熒光團會被同時激發。只有波長大于550nm時才能選擇性地激發其中的一種,從而獲得光譜鑒別。圖1. ...
固態光源點亮熒光原位雜交技術---提升生物醫學研究和臨床診斷新選擇什么是FISH?當然這里的FISH并非水里游的魚類,而是熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,簡稱FISH),這是一種基于雙鏈核酸互補堿基配對的細胞或者組織中特定核酸序列(DNA或者RNA)檢測的技術。就如同釣魚一般,根據堿基互補原則,當使用已知標記單鏈核酸為探針(餌),如果與樣品中的未知單鏈核酸(魚)發生了特異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸,并對該特定核酸順序進行精確定量定位。F:熒光(Flourescence)顯微鏡用于對靶核酸序列位置進行成像。該技術的其他變體也使用顯色原位 ...
革新多路復用熒光檢測長久以來,在復雜、異質的樣品中同時識別以及定位多個分子或者分子組裝的能力一直是推動熒光顯微鏡在生物和物理科學研究中應用的主要特性。例如,自1986年以來,使用四種光譜上的不同熒光團來識別DNA中的腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)和鳥嘌呤(G)堿基,這一直是大多數自動化DNA測序技術的基礎。然而,對大規模生物系統的基因組和轉錄組的研究可能需要同時識別和定位成百上千的分子標靶。這種高度并行的分析超出了基于光譜鑒別的多路復用能力。Lumencor分析了基于光譜鑒別的多路復用熒光檢測的局限性,以及為擴大可檢測標靶數量而引入的一些固態光源新技術。光譜鑒別的局限性大多數多路復 ...
激光雷達領域的新秀利器—SPAD23激光雷達(LiDAR)技術以其精準的距離測量和三維建模成像能力,在多個行業中發揮著重要作用。這項技術主要通過發射激光脈沖并測量這些脈沖與物體碰撞后返回的時間來工作,從而獲得高精度的空間數據。不僅能夠進行測距還能進行復雜場景的計算成像等等。激光雷達技術已廣泛應用于以下行業:地理空間測繪、考古學、自動駕駛車輛、農業、林業管理、城市規劃、災害管理、建筑和建筑管理、交互式媒體和藝術、太陽能和風能項目、軍事和國防、礦業和地質學、基礎設施和建設、大氣研究、機器人技術、制造業、能源行業等等時間飛行(ToF)技術是一種測量物體距離的方法,它通過計算光波從發射到反射回傳感器所 ...
壞樣品。- 熒光干擾:大部分樣品可能會產生伴生熒光,干擾zui終目標信號的檢測為了應對這些限制,從而產生了衍生技術——時間門控拉曼技術:時間門控技術在拉曼中的應用主要是為了提高信噪比,減少熒光干擾。時間門控技術通過在特定時間窗口內選擇性檢測拉曼散射光,排除熒光和其他背景信號。熒光通常比拉曼散射延遲出現,因此可以通過時間門控技術將其過濾掉。通過時間門控拉曼技術可以提高信噪比:時間門控技術能顯著降低熒光背景,提高拉曼信號的檢測鑒別度;非破壞性分析:在高熒光背景的樣品中,時間門控拉曼光譜仍然可以進行非破壞性分析;適用范圍廣泛:時間門控技術適用于各種復雜樣品,包括生物樣品、藥物和材料科學中的高熒光樣品 ...
- mpt是熒光壽命成像的合適探測器。2. CCDs and ICCDs一般來說,ccd是RS中特別常用的檢測器變體,但對于TG設置,它們需要高度敏感(單光子計數能力),允許快速外部觸發,并具有亞納秒范圍內的時間分辨率。iccd符合這些要求。光學克爾門控,它的作用就像光譜儀入口狹縫前的一個光百葉窗,已經被幾個小組用來觸發CCD。這種設置需要空間,因此限制了系統的可移植性。Talmi制定了拉曼多通道和門控檢測的選擇指南。1993年,Tahara和Hamaguchi首先通過構造一個增強的基于ccd的條紋相機實現了高靈敏度和良好的時序分辨率。TG拉曼裝置中的條紋相機將樣品的背散射光引導到光電陰極上; ...
點是樣品誘導熒光發射。這是一個競爭現象,發生在相對較弱的拉曼散射下,并且可以模糊整個拉曼光譜,使材料的識別或量化成為不可能。解決這一問題的有效方法是時間門控(TG),這是信號處理中常用的一種技術。熱重光譜的目的是測量特定時間段內的信號,從而實現對瞬態過程的監測。早在20世紀70年代,隨著科學家們在測量過程中尋找去除熒光背景信號的方法,TG就進入了RS領域。然而,TG拉曼直到zui近幾年才開始商業化。為了擴大RS的普遍適用性,克服熒光限制是很重要的。RS基于從激發波長位移的光子的非彈性散射,稱為Stokes和AntiStokes位移。它用于提供給定樣品中受激分子的信息。與紅外光譜(IR)類似,該 ...
輸出用于激發熒光血管造影劑---吲哚菁綠(ICG)。除了光譜輸出外,SPECTRA光引擎還提供了三個附加功能,可增加其在術中成像應用中的實用性:1.光傳輸SPECTRA光引擎的光輸出通常以光纖束傳輸。光纖束可以進行分支,提供兩路或者多個等分的光輸出,這些光輸出可以憑借不同的角度軌跡定向到手術區域。多向照明規避了可訪問性和可見性的限制,在手術區域等密閉空間中實現三維成像。2.不同設備的一致性能這一特性對于消除外窺鏡或者其他手術設備中光源的安裝和驗證中的不確定性至關重要。因此,SPECTRA光引擎進行設計、制造和測試,旨在從一個設備到另一個設備提供一致的性能。圖3展現了這一特性,比較了50臺SPE ...
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