拉曼光譜中熒光抑制方法的主要類別拉曼光譜在大多數(shù)應(yīng)用中的一個(gè)嚴(yán)重問(wèn)題是強(qiáng)熒光背景,這部分歸因于拉曼光譜的低截面散射。在激光激發(fā)下,熒光與Stokes Raman散射同時(shí)發(fā)生,因?yàn)榧t移的Stokes Raman散射與熒光發(fā)射光譜重疊。反斯托克斯拉曼散射不存在熒光問(wèn)題,因?yàn)榕c激發(fā)波長(zhǎng)相比,反斯托克斯拉曼散射是藍(lán)移的,因此在光譜中與熒光自然分離。當(dāng)用可見(jiàn)光激發(fā)時(shí),熒光本底問(wèn)題更為嚴(yán)重。拉曼光譜中的強(qiáng)熒光信號(hào)直接影響拉曼測(cè)量的準(zhǔn)確性和靈敏度。熒光和自發(fā)拉曼信號(hào)在波長(zhǎng)維度上重疊,因此不能用簡(jiǎn)單的濾光片分離。幸運(yùn)的是,它們?cè)谝韵滦再|(zhì)上有所不同,這是許多拉曼測(cè)量中熒光抑制方法的基礎(chǔ):1.熒光發(fā)射壽命(納秒量 ...
抑制熒光的時(shí)域拉曼光譜技術(shù)圖1顯示了激發(fā)激光脈沖、發(fā)射拉曼散射信號(hào)和發(fā)射熒光的時(shí)間輪廓。熒光過(guò)程包括激發(fā)、內(nèi)部轉(zhuǎn)換和發(fā)射三個(gè)重要步驟,每個(gè)步驟都發(fā)生在不同的時(shí)間尺度上。首先,入射光子激發(fā)熒光團(tuán)分子的時(shí)間為飛秒(10-15秒)量級(jí)。其次,振動(dòng)弛豫的無(wú)輻射內(nèi)轉(zhuǎn)換過(guò)程也非常快,在10-14 ~ 10-11 s之間。最后,熒光發(fā)射是一個(gè)緩慢的過(guò)程,大約發(fā)生在10-9-10-7 s左右。熒光壽命是指分子在發(fā)射熒光光子前處于激發(fā)態(tài)的平均時(shí)間。圖1所示的指數(shù)衰減曲線說(shuō)明了熒光發(fā)射時(shí)間的統(tǒng)計(jì)分布。單熒光團(tuán)的熒光時(shí)間輪廓符合壽命常數(shù)τ的指數(shù)函數(shù),而拉曼發(fā)射幾乎與激發(fā)激光同時(shí)發(fā)生。由于拉曼信號(hào)比熒光信號(hào)的發(fā)射速度 ...
1和T3上的熒光強(qiáng)度較低,但淬滅性能顯著。TRPL相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)如圖1(d)所示,其通過(guò)擬合雙指數(shù)衰減函數(shù)而獲得。如表1所示,〖τ?1〗和τ_2分別對(duì)應(yīng)于電荷載流子的非輻射和輻射結(jié)合壽命。在ETL的存在下,τ_1和τ?1〗(4.42ns)和τ_2(22.64ns),更加表明了T2過(guò)程具有優(yōu)異的薄膜質(zhì)量和最小的本征缺陷。圖1. (a)ITO/PEN和ETL/ITO/PEN薄膜的光學(xué)透射光譜;(b)PSCs的帶隙譜圖;(c)不同PEN/ITO/ETL/PVK歸一化穩(wěn)態(tài)熒光譜圖;(d)PEN/PVK和PEN/ITO/ETL/PVK的時(shí)間衰變光致發(fā)光光譜。如圖2(a)為在AM1.5G的輻照下使用不同E ...
實(shí)驗(yàn)使用綠色熒光量子點(diǎn)樣品比較廣域時(shí)間對(duì)焦和基于DMD的線掃描時(shí)間對(duì)焦技術(shù)的軸向分辨率。DMD選取不同寬度的條紋圖樣對(duì)比結(jié)果,條紋寬度3像素直到全部像素(全亮)。寬場(chǎng)時(shí)間聚焦激發(fā)(紅點(diǎn))和線掃描時(shí)間聚焦激發(fā)(藍(lán)點(diǎn))的z軸綜合熒光強(qiáng)度分布圖比較。DMD的尺寸為128 × 128像素,寬視場(chǎng)測(cè)量為“on”,行掃描模式為128 × 3像素序列為“on”。數(shù)據(jù)擬合為洛倫茲函數(shù)(實(shí)線)。上圖比較兩種方案在z軸上的分辨能力,線掃描照明的FWHM比寬場(chǎng)照明明顯減少,表明線掃描軸向分辨率有提高。使用花粉顆粒作為樣品比較:花粉粒的雙光子時(shí)間聚焦熒光圖像。花粉顆粒的圖像為寬場(chǎng)、128 × 128 個(gè)"開(kāi) ...
算的,尤其在熒光應(yīng)用領(lǐng)域廣泛)。45 mm的齊焦設(shè)計(jì)可以在Z短光程的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)高分辨率,高視場(chǎng)亮度的效果。4.工作距離物鏡的工作距離是指顯微鏡準(zhǔn)確聚焦至樣品表面后,待測(cè)樣品表面與物鏡的Z前端表面之間的距離。物鏡的放大率越高,工作距離越短。使用時(shí),待測(cè)樣品應(yīng)位于物鏡的一到二倍焦距之間。因此,它和焦距是兩個(gè)不同的參數(shù),顯微鏡調(diào)焦的步驟實(shí)際是在調(diào)節(jié)物鏡的工作距離。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下,工作距離短,孔徑角則大。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡,其工作距離小。5.分辨率分辨率是指能清晰的分辨待測(cè)樣品表面兩點(diǎn)間的Z小距離,通常用d表示。分辨率決定了顯微鏡分辨樣品上細(xì)節(jié)的程度。顯微鏡的物鏡是使物體放大成實(shí)像,目鏡 ...
實(shí)現(xiàn)時(shí)間分辨熒光光譜需要記錄激光脈沖激發(fā)后發(fā)射光隨時(shí)間變化的強(qiáng)度分布。理論上可以記錄單個(gè)激發(fā)-發(fā)射循環(huán)的信號(hào)的時(shí)間衰減曲線,但在實(shí)際應(yīng)用中還存在著許多問(wèn)題。首先,要記錄的時(shí)間衰減非常快,比如普遍使用的有機(jī)熒光團(tuán)的光致發(fā)光過(guò)程僅持續(xù)幾百皮秒到幾十納秒;另外不僅要獲取熒光壽命,還要還原熒光衰減曲線形狀,通常為了解決多指數(shù)衰減,必須能夠在時(shí)間上將記錄的信號(hào)解析到這樣的程度:由幾十個(gè)樣品進(jìn)行衰減。使用普通的電子瞬態(tài)記錄儀很難達(dá)到所需的時(shí)間分辨率。 另外如果發(fā)射的光太弱則無(wú)法產(chǎn)生代表光通量的模擬電壓。 實(shí)際上光信號(hào)可能只有每個(gè)激發(fā)/發(fā)射周期的幾個(gè)光子。 然后信號(hào)本身的離散特性導(dǎo)致無(wú)法進(jìn)行模擬采樣。 即使 ...
率以快速獲取熒光衰減直方圖,比如在要研究動(dòng)態(tài)壽命變化或快速分子轉(zhuǎn)變或必須收集大量壽命樣本(例如二維掃描成像)的情況下,這可能特別重要。PMT(取決于設(shè)計(jì))可以處理高達(dá)每秒 1 到 20 百萬(wàn)次計(jì)數(shù) (cps) 的計(jì)數(shù)率。基于老式 NIM 的 TCSPC 電子設(shè)備最多能夠處理 50,000 到 500,000 cps。采用現(xiàn)代集成 TCSPC 設(shè)計(jì),例如 TimeHarp 260,可實(shí)現(xiàn)高達(dá) 40 Mcps 的計(jì)數(shù)率。韓國(guó)Nanobase 共聚焦光路結(jié)合PicoQuant單光子計(jì)數(shù)技術(shù)可實(shí)現(xiàn)高效率熒光壽命成像。您可以通過(guò)我們的官方網(wǎng)站了解更多的產(chǎn)品信息,或直接來(lái)電咨詢4006-888-532。 ...
出現(xiàn)了很強(qiáng)的熒光背景,這進(jìn)一步表明了注入過(guò)程中強(qiáng)有力摻雜效應(yīng)。再去除外加電壓之后,石墨烯表面出現(xiàn)了和原始樣品相似的拉曼光譜。圖1. 離子液體注入多層石墨烯器件的原位拉曼測(cè)試:(a)原位拉曼測(cè)試過(guò)程圖解;(b)在不同偏壓下表面多層石墨烯的拉曼光譜;(c)原始(黑色)、注入(紅色)和非注入(藍(lán)色)的多層石墨烯表面的拉曼光譜圖如圖2所示,多層石墨烯在插入偏壓的薄層阻抗通過(guò)四點(diǎn)電阻率法來(lái)測(cè)試,石墨烯層之間弱的范德華力允許原子或小分子注入到范德華間隙中。在此種情況下,離子液體中的陽(yáng)離子/陰離子在偏壓下注入層中,結(jié)果石墨烯上的電荷密度顯著增加并且多層石墨烯的薄膜阻抗在低于2V從11Ω顯著降低到高于3.5V ...
金相顯微鏡或熒光鏡檢法。1. 透射式照明透射式照明方法按照其光軸方向又分中心照明和斜射照明兩種形式:(1) 中心照明:中心照明是最普遍的透射式照明法,其特點(diǎn)是照明光束的中軸與顯微鏡的光軸同在一條直線上,一般從待觀察樣品的正下方入射。它又分為臨界照明和柯勒照明兩種。圖1.臨界照明臨界照明:如上圖1,臨界照明的光源經(jīng)聚光鏡聚焦后成像在待觀察樣品上,光束狹而強(qiáng),這是它的優(yōu)點(diǎn)。但是光源的燈絲像與被檢物體的平面重合,這樣會(huì)造成待觀察樣品表面的照明不均勻,在有燈絲像的部分照明比較亮;無(wú)燈絲像的部分照明就較為暗,不僅會(huì)影響成像的質(zhì)量,更不適合顯微照相,這是臨界照明的主要缺陷。針對(duì)上述問(wèn)題的解決方法是在光源的 ...
例如寬視場(chǎng)、熒光或者非線性顯微鏡等等。用于顯微鏡的高效率激光在多光子、共聚焦甚至超分辨顯微鏡中,熒光效率主要取決于激發(fā)光的質(zhì)量。Phasics AO方案能夠優(yōu)化激發(fā)光場(chǎng),讓所有光都聚焦在感興趣的區(qū)域。Phasics的傳感器分辨率相對(duì)比較高,測(cè)量的像差特征也更加完整,因此在自適應(yīng)光學(xué)中有更好的效果。改善光鑷和光活化SLM設(shè)備可以產(chǎn)生特定形狀的光斑,用于控制細(xì)胞和分子。為了能夠在產(chǎn)生最大的力量,光束應(yīng)該全部聚焦在目標(biāo)上。Phascis AO方案通過(guò)改善像差,能夠校正顯微光學(xué)元件、SLM以及激光自身像差。厚組織直接成像當(dāng)樣品需要通過(guò)比較厚的介質(zhì)時(shí),成像會(huì)比較模糊。Phasics提供了一種新的直接成像 ...
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