光分子因為受激發射而產生熒光信號,接著繼續照射使這些發光的熒光分子產生漂白, 在下一輪不能被激發光再次激活。之后交替使用405nm和561nm激光來進行激活,激發和漂白其他的熒光分子。往復循環,直至全部完成稀疏標記的細胞成像。圖1展示了使用光激活定位顯微技術PALM 定位單個熒光分子最后實現超光學衍射極限分辨率成像的示意圖。PALM的成像方法只能觀察基于細胞外源表達的蛋白質。圖1.PALM超分辨率顯微成像系統原理及示意圖PALM超分辨系統系統部分組成及光路結構:(1)倒置熒光顯微鏡:可以用于激光掃描共焦顯微成像或者單分子PALM顯微成像。(2)半導體激光:405nm激光器作為激活光,561nm ...
下。通過增加激發光的強度來增加熒光燈的數量是不可行的,因為這會傷害魚類。圖2 HiCAM高速像增強熒光相機附在熒光顯微鏡上實驗裝置用安裝有Lambert HiCAM高速攝像系統的熒光顯微鏡對斑馬魚進行研究(圖2)。將魚固定在凝膠中,從下方照射。DsRed蛋白的熒光從紅細胞中發出。這種光向各個方向發射,其中一些光以相反的方向穿過激光的光路。但是,熒光通過二色鏡被定向到相機上,而不是被反射回光源。任何散射的激發光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光,只透射紅細胞熒光發出波長的光。圖像傳感器將捕捉進來的熒光。捕捉將以每秒數百或數千幀的幀率下進行,每幀的曝光時間數量級在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子 ...
光差頻獲得的激發光譜是否與相關文獻拉曼光譜相匹配?更多詳情請聯系昊量光電/歡迎直接聯系昊量光電關于昊量光電:上海昊量光電設備有限公司是光電產品專業代理商,產品包括各類激光器、光電調制器、光學測量設備、光學元件等,涉及應用涵蓋了材料加工、光通訊、生物醫療、科學研究、國防、量子光學、生物顯微、物聯傳感、激光制造等;可為客戶提供完整的設備安裝,培訓,硬件開發,軟件開發,系統集成等服務。您可以通過我們昊量光電的官方網站www.champaign.com.cn了解更多的產品信息,或直接來電咨詢4006-888-532。 ...
戰性的部分是激發源,它必須產生兩個同步的激光脈沖---泵浦和斯托克斯,需具有以下幾點特征:1. 頻率失諧在500和之間連續變化,以覆蓋所有相關的振動躍遷。這意味著至少有一個泵浦/斯托克斯脈沖是廣泛可調的。例如,假設一個固定的泵浦波長為800納米,斯托克斯必須在835和1110 nm。2.脈沖持續時間為1 - 2 ps,對應于變換限制脈沖的帶寬為以這種方式匹配壓縮相中振動躍遷的典型線寬。這種選擇優化了峰值功率和光譜分辨率之間的權衡。較佳脈沖持續時間也可以取決于實驗條件,因為已經表明,在某些情況下,響應是一個與時間相關的函數,因此信號可以對調制光束強度具有非線性依賴關系。3.近紅外波長,從700到 ...
固有性質,當激發波長遠離電子共振時,拉曼截面基本上不會改變。然而,對于外部探針,當電子共振出現在激勵束的頻率附近時,拉曼截面可以顯著提高。共振拉曼散射原理可應用到CRS系統的光激發中,達到相應提高分子濃度的檢出限的作用。這一方法要求發色團表現出與電子共振良好耦合的振動模式。如受激拉曼散射系統(SRS)所示,當激發頻率在電子躍遷附近調諧時,為熒光標記目的開發的熒光團顯示高達倍的振動響應的出色增強。結果是這種熒光探針可以通過CRS工藝在亞微米濃度下檢測到。這是重要的,因為它開辟了在多標簽樣品中映射不同探針的可能性,不同探針的數量受限于拉曼線的帶寬,而不是熒光的帶寬。由于檢測通道之間的串擾,在熒光顯 ...
被收集,即使激發激光是線偏振的。如果您對拉曼光譜成像有興趣,請訪問上海昊量光電的官方網頁:http://www.champaign.com.cn/three-level-59.html更多詳情請聯系昊量光電/歡迎直接聯系昊量光電關于昊量光電:上海昊量光電設備有限公司是光電產品專業代理商,產品包括各類激光器、光電調制器、光學測量設備、光學元件等,涉及應用涵蓋了材料加工、光通訊、生物醫療、科學研究、國防、量子光學、生物顯微、物聯傳感、激光制造等;可為客戶提供完整的設備安裝,培訓,硬件開發,軟件開發,系統集成等服務。您可以通過我們昊量光電的官方網站www.champaign.com.cn了解更多的產品信息 ...
合光學顯微鏡激發這些樣品,并收集拉曼光譜8 s。作者發現,受傷的大腦在1660 cm?1處顯示出酰胺I振動的減少,同時在1560和1640 cm?1處出現尖銳的條帶。免疫組織學顯示,這些條帶與Caspase 3水平的升高和神經元凋亡的激活有關。其他作者也使用整個小鼠大腦作為TBI模型,能夠使用共聚焦拉曼顯微鏡確定時間變化。在早期“急性”期,由于·剛開始的出血,出現了與血紅素相關的強信號。7天后,血紅素信號消失,但觀察到膽固醇對應的拉曼帶增加,這被認為與細胞修復過程有關。近期,在大鼠腦切片中結合拉曼顯微鏡和傅里葉變換紅外顯微光譜證實,病變部位的膽固醇水平升高。與此同時,與蛋白質相關的拉曼信號增加 ...
更短的UV光激發出的熒光通常在300nm以上,可以與拉曼信號進行有效的分辨。但是紫外光的劣勢也很明顯,那就是能量較高,容易損壞材料,而其價格和制造難度也相對較高。綜上,對于拉曼應用的激光器選擇,需要綜合考慮拉曼信號強度,分辨率,材料強度,光源價格等一系列因素。法國Oxxius公司提供紫外-近紅外全波段的高穩定性激光器,特別是其單縱模激光器,具有窄線寬和高光譜純度的優點,適用于拉曼應用的多種場景。其中拉曼應用常用的532nm和785nm單縱模激光器,線寬能夠達到1MHz和100MHz。其高穩定性、500mW高功率和高性價比等特點,廣各類院所好評。圖2.Oxxius公司532nmDPSS單縱模激光 ...
品處于較高的激發態還是較低的激發態。這被稱為拉曼效應。盡管直接吸收需要紅外頻率來改變振動狀態,但在拉曼中,信號相對于原始光源的位移量與振動能量狀態的變化相對應。如果激發光源是單色的,拉曼散射信號可以被分散,在稱為化學指紋區的頻帶中顯示出尖銳振動峰的頻譜。與FTIR相比,拉曼的優勢在于它可以使用可見光或近紅外光進行,可以通過玻璃窗、顯微鏡光學和使用標準的硅ccd探測器進行非接觸式采樣。然而,拉曼散射是二階效應,相對較弱,因此需要激光源提供可測量的信號強度。與此同時,被樣品和系統光學散射的激光比拉曼信號強幾個數量級,并產生必須有選擇性地阻擋的噪聲背景。這限制了早期對拉曼的接受。但固態激光器和二極管 ...
于采樣體積(激發光與材料相互作用的體積)和儀器參數,如激發激光頻率和強度、探測器效率和增益以及測量積分時間。如果這些實驗參數在測量之間保持一致,來自薄膜樣品的拉曼信號的強度可能被用作薄膜厚度的測量。在一定的薄膜厚度下,測量的拉曼強度增強并且已被證明是由于在薄膜界面上的多次反射的入射光以及拉曼散射光的干涉。這種干涉增強拉曼散射(IERS)現象被用于最大化拉曼信號,這些信號來自于沉積在襯底上的較厚層之上的非常薄的層。自從首次證明石墨烯在硅襯底上的拉曼增強,一些研究人員使用拉曼強度比來估計石墨烯的厚度,MoS2,或六方氮化硼沉積在SiO2/Si上。這些厚度或層數的估計使用了樣品與襯底拉曼強度的比值, ...
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